Predobrada uzorka treba uključiti sve radnje prije ubrizgavanja. Uz korake kao što su vaganje, otapanje i razrjeđivanje, uzorku je potrebno: ① filtracija; ② ekstrakcija; ③ derivatizacija (derivacija prije stupca); ④ tekućinska kromatografija (niskotlačna kromatografija na stupcu) pričekajte. Ove operacije mogu se izvoditi ručno ili automatski. Svrha predobrade uzorka je ukloniti smetnje, povećati osjetljivost detektora (obogaćivanje), zaštititi kromatografsku kolonu itd. Budući da se neki uzorci ne mogu ubrizgati i analizirati nakon prethodne obrade, potrebno ih je derivatizirati tako da neke komponente bez UV apsorpcije ili fluorescencije mogu detektirati UV i fluorescentnim detektorima nakon derivatizacije. Ovo ne samo da poboljšava osjetljivost, nego i poboljšava rezoluciju (promjena mase). Predobrada uzorka također će dovesti do nekih problema, kao što je gubitak uzorka, kontaminacija uzorka, nepotpuna reakcija derivatizacije ili stvaranje višestrukih reaktanata.
Problemi s ekstrakcijom Svrha ekstrakcije je odvojiti komponente koje se analiziraju iz ko-topivog medija uzorka ili smanjiti tvari koje oštećuju kolonu (kao što su proteini, itd.) i interferencije. Općenito se koristi ekstrakcija organskim otapalom. Otapalo koje se koristi za ekstrakciju mora imati nisku toksičnost, dobru hlapljivost, malo nečistoća, dobru topljivost uzorka koji se ispituje i ne može se miješati s vodom. Uobičajeno korištena otapala uključuju dietil eter, etil acetat, metilen klorid, kloroform, benzen ili mješavinu dva ili više otapala. Nakon ekstrakcije, uzorak se općenito može izravno ubrizgati. Ponekad je potrebno koncentrirati ili osušiti i koncentrirati, a zatim koristiti fiksni volumen tekuće ili mobilne faze za otapanje uzorka za injekciju. Ovo ne samo da povećava koncentraciju uzorka, već također poboljšava osjetljivost dok se izbjegava interferencija vrha otapala na vrh uzorka. Tijekom ekstrakcije mora se uzeti u obzir topljivost molekula uzorka. Osim komponenti topivih u mastima i u vodi, postoje i komponente topive u mastima koje se koriste za dobivanje soli topivih u vodi. Metoda ekstrakcije je sljedeća: Uzorci topljivi u vodi: 1. Metoda ekstrakcije kiselih komponenti i stvorenih soli: Ekstrahirajte nečistoće organskim otapalima i zatim prilagodite. Postaje kiselo, a zatim dodaje organsko otapalo za ekstrakciju ili ubrizgavanje, ili suši. pod protokom N₂, otapa ga s odgovarajućim otapalom i zatim ubrizgava uzorak. 2. Metoda ekstrakcije alkalnih komponenata i stvorenih soli: ekstrahirajte nečistoće organskim otapalom i učinite ga alkalnim, zatim dodajte organsko otapalo za ekstrakciju ili ubrizgavanje ili osušite fenom pod strujom N₂, otopite odgovarajućim otapalom i zatim ubrizgajte uzorak . 3. Metoda ekstrakcije neutralne komponente: ① Nakon ekstrakcije nečistoća organskim otapalom, analizirajte izravno kromatografijom reverzne faze; ② Metoda ekstrakcije komponenti topljivih u mastima: ekstrakcija ili ubrizgavanje organskim otapalom ili sušenje pod protokom N₂ i korištenje odgovarajućeg otapala Ubrizgajte uzorak nakon otapanja;
Pitanja kontaminacije: Općenito, okolina testiranja, spremnici i reagensi su čimbenici koji utječu na rezultate mjerenja. 1. Onečišćenje okoliša Štetni plinovi, plinske otopine, prašina itd. u prostoriji s instrumentima mogu uzrokovati onečišćenje i utjecati na rezultate ispitivanja. Ovakvo onečišćenje je teško ispraviti. Stoga prostorija s instrumentima treba biti izolirana od drugih laboratorija i održavana čistom. U prostoriji s instrumentima treba postaviti klima uređaj. Napomena: otpornost na vlagu, koroziju, otpornost na udarce i relativna vlažnost zraka trebaju biti manje od 70%. 2. Često korišteno posuđe u spremničkim laboratorijima uključuje staklo, porculan, kvarc, plastiku, itd. Prilikom provođenja analize, posuđe treba odabrati prema zahtjevima uzorka koji se obrađuje. Bez obzira koji se pribor koristi, traka za pranje posude mora biti čista. Svi su oni vrlo važni i ujedno su osnovno jamstvo za postizanje dobrih rezultata testiranja. 3. Reagensi U analizi tekućinskom kromatografijom, odabrani reagensi moraju biti kromatografski čisti, vrhunskog stupnja čistoće ili analitički čisti. Ako se koriste reagensi koji sadrže nečistoće, pojavit će se vrhovi nečistoća i utjecati na rezultate mjerenja. Problemi sa standardnim otopinama: Kada pripremate standardnu otopinu, prvo morate pripremiti internu standardnu otopinu s trenutnom koncentracijom. Najbolje je koristiti otopinu internog standarda pripremljenu u istoj seriji za standardnu otopinu i otopinu uzorka kako bi se smanjile pogreške. 1. Tvari korištene za pripremu standardne otopine trebaju biti kromatografski čiste i stabilne prirode. 2. Uobičajene standardne otopine treba čuvati u smeđim bocama s otopinom na niskoj temperaturi. 3. Kada se pripremaju standardi vitamina, treba ih staviti u smeđu odmjernu tikvicu ili ih držati podalje od svjetlosti kako bi se izbjeglo raspadanje.
Sažetak
Ukratko, za analitičke instrumente najvažniji način izbjegavanja kvarova je ispravan rad i podešavanje. Izbjegavajte rad na slijepo. Kako biste smanjili razne greške u sustavu, obratite pozornost na gore navedene točke, a također obratite pozornost na dnevno održavanje instrumenta i dnevno održavanje kromatografske kolone. , održavajte prostoriju s instrumentima čistom, tako da tekućinski kromatograf može biti u optimalnom radnom stanju i igrati važnu ulogu u analizi.